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MILLIPOREECL化学发光底物发光时间长可反复曝光
浏览次数:1718发布日期:2017-09-20
 
  
  MILLIPOREECL化学发光底物是指在化学发光反应中参与能量转移并zui终以发射光子的形式释放能量的化合物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。
  
  1.氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是zui常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮)的分子结构及化学反应式如下:
  
  鲁米诺反应结构式
  
  鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。异鲁米诺衍生物ASEI和ABMI等也是常用的标记物。
  
  2.吖啶酯(acridiniumester,AE)类类发光剂不需催化剂的存在,在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。反应式如下:
  
  电化学发光原理
  
  上式反应迅速,在1~5s内即可完成;具有背景低、信比高的优点,其检测极限可达5×10-9mol,发光量与AE浓度呈良好的线性反应,是一类的标记物。
  
  3.电化学发光(electrochemiluminescence,ECL)反应在电极表面进行。发光底物为三联吡啶钌[Ru(bpy)32+],另一反应物为三丙胺(TPA)。在阳电极表面,以上两化学物质可同时失去电子发生氧化反应(图2)。二价的Ru(bpy)32+被氧化成三价Ru(bpy)33+,TPA被氧化成阳离子自由基TPA+●,后者失去一个质子(H+),成为自由基TPA●,这是一个强还原剂,可将一个电子递给三价的Ru(bpy)32+*,而TPA自身被氧化成TPA氧化产物。激发态的Ru(bpy)32+*在衰减时发射一个波长为620nm的光子,重新生成基态的Ru(bpy)32+。这一过程在电极表面周而复始地进行,产生许多光子,使信号得以增强。
  
  4.MILLIPOREECL化学发光底物产品特点
  
  灵敏:信号强背景低,所需抗原抗体量少。
  
  持久:发光时间长,可进行反复曝光,进行结果优化,而不需要重复Blot。
  
  快捷:MILLIPOREECL化学发光底物操作简单方便,且数秒内即可产生强烈信号。
  
  定量:使用反射型显像密度计或者CCD相机扫描已曝光的X光片,可对目的蛋白进行定量。
  
  稳定:产品有效期长,4℃可保存1年;且曝光后X光片上的印迹不褪色,可使实验结果长期保存。
  
  
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